Saturday, January 28, 2023
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प्रोटिओमिक्स के लिए एक व्यापक गाइड

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परिधीय रक्त मोनोन्यूक्लियर सेल क्या हैं?
मानव परिधीय रक्त मोनोन्यूक्लियर सेल (PBMCs) परिधीय रक्त में प्रतिरक्षा कोशिकाएं हैं जिनमें एक एकल, गोल नाभिक होता है। PBMCs में लिम्फोसाइट्स, मोनोसाइट्स और उनकी व्युत्पन्न कोशिकाएं शामिल हैं। अनुसंधान और नैदानिक ​​उद्देश्यों के लिए, मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं को ल्यूकोपाक्स से अलग किया जाता है, जो परिधीय रक्त से सफेद रक्त कोशिकाओं को निकालने से समृद्ध रक्त के नमूने होते हैं।1,2

शोधकर्ता पीबीएमसी को कैसे अलग करते हैं?
ल्यूकेफेरेसिस क्या है?
वैज्ञानिक ल्यूकेफेरेसिस द्वारा स्वस्थ मानव दाताओं के परिधीय रक्त से ल्यूकोपाक्स एकत्र करते हैं – एक प्रक्रिया जो विशिष्ट कोशिकाओं को इकट्ठा करने के लिए रक्त घटकों को अलग करती है और अनावश्यक घटकों को परिसंचरण में वापस लाती है।1-3 आम तौर पर, स्वास्थ्य देखभाल पेशेवर निरंतर प्रवाह सेंट्रीफ्यूगेशन (सीएफसी) को रक्त एकत्र करने, स्पिन करने और रक्त वापस करने के लिए नियोजित करते हैं, जबकि दाता एफेरेसिस सर्किट नामक एक उपकरण से जुड़ा होता है। सीएफसी घनत्व के आधार पर पूरे रक्त को अंशों में अलग करके पीबीएमसी को समृद्ध और एकत्रित करता है। प्लाज्मा परत के नीचे, PBMCs अपकेंद्रित्र द्वारा उत्पादित ऊपरी, कम-घनत्व वाले अंश में स्थित होते हैं, जबकि लाल रक्त कोशिकाएं और ग्रैन्यूलोसाइट्स निचले, उच्च-घनत्व वाले अंश में होते हैं। अलग होने के बाद, जिन अंशों में PBMCs नहीं होते हैं, उन्हें एफेरेसिस सर्किट द्वारा रोगी को वापस कर दिया जाता है।1,2,4 इस प्रणाली का मुख्य लाभ यह है कि प्रक्रिया के दौरान दाता के संचलन के बाहर रक्त की केवल थोड़ी मात्रा होती है। इस वजह से, रोगियों को आमतौर पर ल्यूकेफेरेसिस के दौरान द्रव प्रतिस्थापन की आवश्यकता नहीं होती है।2

PBMCs के अलगाव को दर्शाने वाला चरण-दर-चरण फ़्लो चार्ट।

वैज्ञानिक ल्यूकेफेरेसिस नामक एक प्रक्रिया के माध्यम से स्वस्थ मानव दाताओं के परिधीय रक्त से ल्यूकोपैक एकत्र करते हैं, जो घनत्व के आधार पर रक्त के विशिष्ट घटकों को अलग करता है। शोधकर्ता PBMCs को अन्य रक्त घटकों से निरंतर प्रवाह सेंट्रीफ्यूगेशन (CFC) से अलग करते हैं और अनावश्यक घटकों को वापस परिसंचरण में लौटाते हैं।1-4

पृथक मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं के प्रकार
पीबीएमसी में लिम्फोसाइट्स जैसे टी सेल, बी सेल और एनके सेल और मोनोसाइट्स जैसे डेंड्राइटिक सेल और मैक्रोफेज शामिल हैं। मनुष्यों में, इन प्रकार की कोशिकाओं की आवृत्ति भिन्न होती है। आमतौर पर, लिम्फोसाइट्स PBMCs के लगभग सत्तर से नब्बे प्रतिशत के लिए खाते हैं और मोनोसाइट्स लगभग दस से बीस प्रतिशत बनाते हैं। कोई फर्क नहीं पड़ता कि विशिष्ट सेल प्रकार, पीबीएमसी प्रतिरक्षा होमियोस्टेसिस और सूजन के आवश्यक मध्यस्थ हैं।1

बिसल्फ़ाइट रूपांतरण रासायनिक प्रतिक्रिया है जो तब होती है जब वैज्ञानिक सोडियम बाइसल्फाइट के साथ डीएनए का इलाज करते हैं। 1992 में, शोधकर्ताओं ने पाया कि अनमेथिलेटेड साइटोसिन के साथ सोडियम बाइसल्फाइट की एमिनेशन प्रतिक्रिया 5mC के साथ सोडियम बाइसल्फाइट की प्रतिक्रिया से अलग है। इस अंतर के कारण, एकल-फंसे डीएनए में अनमेथिलेटेड साइटोसिन सोडियम बाइसल्फ़ाइट के संपर्क में आने के बाद यूरैसिल अवशेष बन जाते हैं, जबकि 5mCs साइटोसिन बने रहते हैं। सोडियम बाइसल्फ़ाइट के साथ प्रीट्रीटमेंट कई मेथिलिकरण पहचान और विश्लेषण तकनीकों का आधार है।1 बिसल्फ़ाइट रूपांतरण के बाद, शोधकर्ता रुचि के लोकी में मेथिलिकरण स्थिति का निर्धारण करते हैं क्योंकि पीसीआर प्रवर्धन और अनुक्रमण के बाद अनमेथिलेटेड साइटोसिन को थाइमिन के रूप में पहचाना जाता है।3

शोधकर्ता पीबीएमसी का उपयोग कैसे करते हैं?
इम्यूनोथेरेपी और ऑन्कोलॉजी
शोधकर्ता आमतौर पर इम्यूनोलॉजिकल बीमारियों को बेहतर ढंग से समझने और इम्यूनोथेरेपी विकसित करने के लिए पीएमबीसी का उपयोग करते हैं। उदाहरण के लिए, वैज्ञानिक अस्थमा और अन्य एलर्जी रोगों के रोगजनन की जांच करने के लिए पीबीएमसी का अध्ययन करते हैं जिसमें विभिन्न प्रतिरक्षात्मक मार्ग शामिल होते हैं।5,6 इसके अतिरिक्त, PBMCs कैंसर के उपचार के लिए चिमेरिक एंटीजन रिसेप्टर टी सेल (CAR T) उपचारों के निर्माण के लिए महत्वपूर्ण हैं। सीएआर टी निर्माण प्रक्रिया की शुरुआत में वैज्ञानिक ल्यूकेफेरेसिस के माध्यम से रोगियों से पीबीएमसी को अलग करते हैं। शोधकर्ता जीन संपादन के साथ पृथक टी कोशिकाओं को पुन: प्रोग्राम करते हैं, जो टी कोशिकाओं को कैंसर कोशिकाओं को पहचानने और समाप्त करने की अनुमति देता है जो एक विशिष्ट लक्ष्य प्रतिजन व्यक्त करते हैं। बी सेल लिंफोमा और मल्टीपल मायलोमा जैसे दुर्दमताओं के इलाज के लिए एफडीए द्वारा कई सीएआर टी उपचारों को मंजूरी दी गई है।7

टीका विकास और संक्रामक रोग
कई वैज्ञानिक संक्रामक रोग अनुसंधान और टीका विकास में पीबीएमसी को नियोजित और जांचते हैं। संचलन में विशिष्ट PBMC सबसेट की आवृत्ति का अध्ययन करके शोधकर्ता प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया के बारे में जानकारी प्राप्त करते हैं। यह अनुप्रयोगों के एक मेजबान के लिए उपयोगी है, जिसमें यह समझना शामिल है कि कौन से सेल प्रकार विभिन्न संक्रमणों से लड़ने में शामिल हैं, विशिष्ट एंटीजन के लिए प्रतिरक्षा प्रतिक्रिया की जांच करना और टीकाकरण के बाद प्रतिरक्षा सक्रियण का निर्धारण करना।8 उदाहरण के लिए, जांचकर्ता SARS-CoV-2 संक्रमण के लिए PBMC की मध्यस्थता वाली प्रतिक्रियाओं का अध्ययन कर रहे हैं ताकि यह समझ सकें कि समन्वित और केंद्रित प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाएं सफल वायरल उन्मूलन में कैसे योगदान करती हैं।9

प्रत्यारोपण और पुनर्योजी जीव विज्ञान
रक्त रोगियों से रोगी-व्युत्पन्न स्टेम कोशिकाओं का सबसे सुविधाजनक स्रोत है, और बुनियादी अनुसंधान और नैदानिक ​​अनुप्रयोगों दोनों के लिए वयस्क स्टेम कोशिकाओं का एक बड़ा, सुलभ स्रोत है। पीबीएमसी आबादी में कई प्रकार की अलग-अलग बहुशक्तिशाली पूर्वज कोशिकाएं होती हैं जो रक्त कोशिकाओं, एंडोथेलियल कोशिकाओं, हेपेटोसाइट्स, कार्डियोमायोजेनिक कोशिकाओं, चिकनी मांसपेशियों की कोशिकाओं, ओस्टियोब्लास्ट्स, ओस्टियोक्लास्ट्स, उपकला कोशिकाओं, तंत्रिका कोशिकाओं और मायोफिब्रोब्लास्ट सहित सही परिस्थितियों में विशिष्ट सेल प्रकारों में अंतर कर सकती हैं। . शोधकर्ता संस्कृति में पीबीएमसी आबादी का विस्तार भी कर सकते हैं और उन्हें प्रेरित प्लुरिपोटेंट स्टेम सेल (आईपीएससी) में पुन: प्रोग्राम कर सकते हैं। वैज्ञानिक ऊतकों को पुन: उत्पन्न करने और चोट के बाद कार्य को बहाल करने के लिए परिधीय रक्त-व्युत्पन्न स्टेम कोशिकाओं का प्रत्यारोपण करते हैं, जिससे ये कोशिकाएं पुनर्योजी चिकित्सा में नैदानिक ​​अनुप्रयोगों के लिए आदर्श बन जाती हैं।10

संदर्भ

  1. सीआर क्लीवलैंड, “अध्याय 15 परिधीय रक्त मोनोन्यूक्लियर सेल,” में स्वास्थ्य पर खाद्य बायोएक्टिव्स का प्रभाव: इन विट्रो और पूर्व विवो मॉडल, के। वर्होएक्स एट अल।, एड।, स्प्रिंगर, 2015, पी। 161-67।
  2. ए। गार्सिया एट अल।, “प्रवीणता परीक्षण कार्यक्रमों का समर्थन करने के लिए गुणवत्ता नियंत्रण सामग्री तैयार करने के लिए ल्यूकोपाक पीबीएमसी नमूना प्रसंस्करण,” जे इम्यूनोल तरीके409:99-106, 2014।
  3. NCI डिक्शनरी, “ल्यूकाफेरेसिस,” नेशनल इंस्टीट्यूट ऑफ हेल्थ, https://www.cancer.gov/publications/dictionaries/cancer-terms/def/leukapheresis29 नवंबर, 2022 को एक्सेस किया गया।
  4. एम। भारद्वाज एट अल।, “एलोएक्टिव टी कोशिकाओं का पता लगाना और लक्षण वर्णन,” तरीके मोल बायोल882:309-37, 2012।
  5. डी। वह एट अल।, “संपूर्ण रक्त बनाम पीबीएमसी: अस्थमा में अनुकरणीय जीन अभिव्यक्ति प्रोफाइलिंग में कंपार्टमेंटल अंतर,” एलर्जी अस्थमा क्लिन इम्यूनोल16:67, 2019।
  6. एमए पाशा एट अल।, “एलर्जी रोगों में जन्मजात लिम्फोइड कोशिकाओं की भूमिका,” एलर्जी अस्थमा प्रोक40(3):138-45, 2019।
  7. जे। अब्राहम-मिरांडा एट अल।, “सीएआर-टी जमे हुए पीबीएमसी से निर्मित इन विट्रो उत्पादन में लंबे समय तक कुशल कार्य करता है,” फ्रंट इम्यूनोल13:1007042, 2022।
  8. ए जे पोलार्ड, ईएम बिजकर, “ए गाइड टू वैक्सीनोलॉजी: फ्रॉम बेसिक प्रिंसिपल्स टू न्यू डेवलपमेंट्स,” नेट रेव इम्यूनोल21(2):83-100, 2021।
  9. एससी जॉर्डन, “मनुष्यों में सार्स-सीओवी-2 के लिए सहज और अनुकूली प्रतिरक्षा प्रतिक्रियाएं: अधिग्रहीत प्रतिरक्षा और वैक्सीन प्रतिक्रियाओं की प्रासंगिकता,” क्लिन एक्सप इम्यूनोल204(3):310-20, 2021।
  10. एम। झांग, बी। हुआंग, “परिधीय रक्त मोनोन्यूक्लियर कोशिकाओं की बहु-भेदभाव क्षमता,” स्टेम सेल रेस थेर3(6):48, 2012।
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