Friday, March 29, 2024
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प्रत्येक जीवित कोशिका अनुप्रयोग के लिए प्रतिदीप्त अभिकर्मकों का चयन करना

मिलिपोरसिग्मा

एसवैज्ञानिक लाइव सेल इमेजिंग और डिटेक्शन तकनीकों के साथ वास्तविक समय में गतिशील सेलुलर घटनाओं की निगरानी करते हैं। विभिन्न प्रकार के दृष्टिकोण शोधकर्ताओं को पारंपरिक तरीकों से छूटी हुई घटनाओं को कैप्चर करने की अनुमति देते हैं जो समय में स्थिर क्षणों की जांच करते हैं, जैसे कि क्यूपीसीआर और एंटीबॉडी-आधारित विश्लेषण।1-3

कई लाइव सेल विधियां फ्लोरेसेंस डिटेक्शन पर निर्भर करती हैं। प्रतिदीप्ति की प्रक्रिया में, एक अणु प्रकाश को अवशोषित करता है और बाद में कुछ अवशोषित ऊर्जा को कम ऊर्जा पर फोटॉन के रूप में उत्सर्जित करता है। प्रतिदीप्ति माइक्रोस्कोपी से प्रवाह साइटोमेट्री तक प्रतिदीप्ति-आधारित विधियों का एक मुख्य सिद्धांत, ऑप्टिकल फिल्टर के साथ उत्सर्जित प्रकाश से उत्तेजना प्रकाश को अलग करना है। यह वैज्ञानिकों को विशिष्ट फ्लोरोसेंट अणुओं के अनुरूप शारीरिक प्रक्रियाओं के बीच प्रभावी रूप से निरीक्षण और अंतर करने की अनुमति देता है। इसके अतिरिक्त, शोधकर्ताओं को सफल लाइव सेल इमेजिंग और पहचान के लिए सही फ्लोरोसेंट संकेतकों का चयन करना चाहिए। फ्लोरोसेंट जांच, रंजक और बायोसेंसर में निरंतर प्रगति प्रतिदीप्ति-आधारित दृष्टिकोणों की शक्ति में सुधार करती है, यह सुनिश्चित करती है कि ऐसी तकनीकें कोशिका जीव विज्ञान में महत्वपूर्ण अनुसंधान उपकरण बनी रहें।1-3

सेल ट्रैकिंग के लिए बायोसेंसर

शोधकर्ता गैर-आक्रामक और वास्तविक समय में जीवित कोशिकाओं का प्रभावी ढंग से पता लगाने के लिए फ्लोरोसेंट बायोसेंसर का उपयोग करते हैं। लंबे समय तक जीवित कोशिकाओं को ट्रेस करना सेल चक्र और एपोप्टोसिस जैसी सेलुलर प्रक्रियाओं में मूल्यवान अंतर्दृष्टि प्रदान करता है। लाइव सेल तकनीकों में व्यापक रूप से कार्यान्वित बायोसेंसर का एक सामान्य उदाहरण ग्रीन फ्लोरोसेंट प्रोटीन (जीएफपी) और इसके डेरिवेटिव हैं। वैज्ञानिकों ने जेनेटिक सेल टैगिंग के माध्यम से दीर्घकालिक सेल ट्रेसिंग प्राप्त करने के लिए जेलिफ़िश में प्राकृतिक रूप से पाए जाने वाले बायोल्यूमिनेसेंस सिस्टम से इस फ्लोरोसेंट प्रोटीन को अनुकूलित किया। हालांकि, प्रोटीन-आधारित बायोसेंसर विशिष्ट अनुप्रयोगों तक सीमित हैं, क्योंकि उन्हें आमतौर पर जटिल ट्रांसजेनिक प्रोटोकॉल में विशेषज्ञता की आवश्यकता होती है और शोधकर्ताओं को यह सत्यापित करना चाहिए कि बायोसेंसर अभिव्यक्ति समय के साथ बनी रहे।3-5

फ्लोरोसेंट जांच और रंजक की बहुमुखी प्रतिभा

जांच और रंग जो आनुवंशिक रूप से एन्कोडेड फ्लोरोसेंस पर भरोसा नहीं करते हैं, बायोसेंसर के विकल्प की पेशकश करते हैं। वैज्ञानिक उप-कोशिकीय संरचनाओं जैसे ऑर्गेनेल और झिल्ली को लेबल करने के लिए विशिष्ट अभिकर्मकों का उपयोग करते हैं जो अच्छी तरह से परिभाषित हैं और विशेष कार्य करते हैं। सेल मेम्ब्रेन, न्यूक्लियस, साइटोप्लाज्म, माइटोकॉन्ड्रिया, लाइसोसोम, एंडोप्लाज्मिक रेटिकुलम (ईआर), गोल्गी उपकरण, और साइटोस्केलेटन प्रोटीन सहित विशिष्ट सेलुलर घटकों की लाइव सेल प्रक्रियाओं का अध्ययन करने वाले शोधकर्ताओं के लिए फ्लोरोसेंट स्टेनिंग डाई उपलब्ध हैं। वैज्ञानिक लाइव सेल इमेजिंग में काउंटरस्टेन्स के रूप में ऑर्गेनेल रंगों को भी लागू कर सकते हैं, जो कार्यात्मक अध्ययनों में उपयोगी है। इसके अतिरिक्त, गैर-ऑर्गेनेल, फ्लोरोसेंट जांच और रंगों के रोग-संबंधी लक्ष्यों में एमाइलॉयड सजीले टुकड़े, स्टेम सेल, न्यूरोमस्कुलर जंक्शन, सिनेप्स और ट्यूमर शामिल हैं।1,3,4,6,7

पसंद की चुनौती

बायोइमेजिंग तकनीकों के लिए वैज्ञानिकों को विभिन्न प्रकार के बायोकंपैटिबल, सस्ते और आसानी से उपलब्ध इमेजिंग अभिकर्मकों से लाभ होता है जो प्रतिदीप्ति और ल्यूमिनेसेंस पर निर्भर करते हैं। प्रतिदीप्ति-आधारित विधियों के लिए उपकरणों और अभिकर्मकों की अधिकता लगभग किसी भी अनुप्रयोग के लिए सेलुलर स्तर पर उच्च रिज़ॉल्यूशन प्रदान करती है। कोर फ्लोरोफोरस के प्रतिक्रियाशील समूहों, सब्सट्रेट मोएटीज़, चेलेटिंग घटकों और अन्य रासायनिक गुणों को संशोधित करना आगे फ्लोरोसेंट अभिकर्मकों के संभावित अनुप्रयोगों का विस्तार करता है। हालांकि, एक विशिष्ट जीवित प्रक्रिया की कल्पना करने के लिए एक उपयुक्त फ्लोरोसेंट जांच, डाई, या बायोसेंसर चुनना चुनौतीपूर्ण हो सकता है, क्योंकि अनगिनत अणु उपलब्ध हैं। शोधकर्ता विशिष्ट गुणों और विभिन्न अभिकर्मकों के अनुप्रयोगों को समझकर फ्लोरोसेंट संकेतक चयन को आसान बना सकते हैं।4,5,8

LuminiCell Trackers™ के साथ Vivo कैंसर सेल ट्रैकिंग में

LuminiCell Trackers™ A के साथ Vivo कैंसर सेल ट्रैकिंग में LuminiCell Tracker™-670 सेल लेबलिंग किट के साथ MCF-7 कैंसर कोशिकाओं की इन विट्रो ट्रैकिंग। बी) 2 एन एम लुमिनीसेल ट्रैकर ™ 670 द्वारा लेबलिंग के तुरंत बाद एमसीएफ -7 कोशिकाओं के 1 × 106 के साथ माउस के वीवो प्रतिदीप्ति छवि में प्रतिनिधि। सी) ग्राफ कुल ट्रैकिंग अवधि में ट्यूमर साइटों पर एकीकृत प्रतिदीप्ति तीव्रता दिखाता है। 21 दिन।

मिलिपोरसिग्मा

विकल्पों को जानना

मिलिपोरसिग्मा चयन करता है लाइव सेल इमेजिंग अभिकर्मकों आसान। लाइव सेल इमेजिंग अभिकर्मकों के उनके पोर्टफोलियो में उपन्यास फ्लोरोसेंट सेल लेबलिंग प्रौद्योगिकियां, फ्लोरोसेंट लेंटिवायरल बायोसेंसर और पारंपरिक फ्लोरोसेंट रंजक और जांच शामिल हैं। ये अभिकर्मक रीयल-टाइम ऊष्मायन और इमेजिंग सिस्टम के साथ गतिशील सेलुलर घटनाओं को कैप्चर करने के लिए इष्टतम हैं।3,6

MilliporeSigma कई फ्लोरोसेंट रंजक और मार्कर प्रदान करता है जो विविध ऑर्गेनेल के लिए अत्यधिक विशिष्ट हैं। उदाहरणों में पीकेएच और सेलव्यू शामिल हैं® लंबे समय तक जीवित कोशिका झिल्ली लेबलिंग के लिए रंजक; प्री-पैकेज्ड LentiBrite™ फ्लोरेसेंस लेंटिवायरल बायोसेंसर जो ऑटोफैगी, एपोप्टोसिस और सेल स्ट्रक्चर में शामिल प्रोटीन के लिए कोड करता है; ऑर्गेनेल लेबलिंग, एपोप्टोसिस डिटेक्शन, सेल व्यवहार्यता और स्वास्थ्य विश्लेषण, हाइपोक्सिया मॉनिटरिंग, आरओएस ट्रैकिंग, कैल्शियम इंडिकेटर फ़ंक्शन, और तंत्रिका और स्टेम सेल संस्कृतियों के लिए बायोट्रैकर लाइव सेल डाई; और एकत्रीकरण-प्रेरित उत्सर्जन प्रौद्योगिकी के आधार पर दीर्घकालिक सेल ट्रैकिंग के लिए ल्यूमिनीसेलट्रैकर™ प्रतिदीप्ति नैनोकण।3,4,6,9-11 पता लगाने की तकनीकों और लाइव सेल डाई, प्रोब और फ्लोरोसेंट प्रोटीन में सुधार जैसे कि जीवित कोशिकाओं की कल्पना और विश्लेषण करने के लिए उन्नत शोधकर्ताओं की क्षमता है, उनकी अंतरकोशिकीय बातचीत, और उल्लेखनीय विस्तार और निष्ठा के साथ उपकोशिकीय प्रक्रियाएं।

संदर्भ

  1. ईसी जेन्सेन, “लाइव-सेल इमेजिंग का अवलोकन: आवश्यकताएँ और उपयोग की जाने वाली विधियाँ,” एनाट आरईसी (होबोकन)296(1):1-8, 2013।
  2. एमजे सैंडरसन एट अल।, “फ्लोरेसेंस माइक्रोस्कोपी,” कोल्ड स्प्रिंग हार्ब प्रोटोक2014(10): 2014।
  3. “लाइव सेल इमेजिंग अभिकर्मकों,” मिलिपोरसिग्मा, https://www.sigmaaldrich.com/CA/en/products/cell-culture-and-analysis/cell-analysis/live-cell-imaging-reagents, 7 नवंबर, 2022 को एक्सेस किया गया।
  4. के. ली एट अल।, “नॉनइनवेसिव लॉन्ग-टर्म सेल ट्रेसिंग के लिए एकत्रीकरण-प्रेरित उत्सर्जन (एआईई डॉट्स) के साथ फोटोस्टेबल फ्लोरोसेंट ऑर्गेनिक डॉट्स,” विज्ञान प्रतिनिधि3:1150, 2013।
  5. वी। बाउबेट एट अल। “एकल-कोशिका स्तर पर बायोलुमिनसेंट Ca21 रिपोर्टर्स के रूप में चिमेरिक ग्रीन फ्लोरोसेंट प्रोटीन-एक्वोरिन,” पीएनएएस97(13):7260-65, 2000।
  6. “इमेजिंग विश्लेषण और लाइव सेल इमेजिंग,” मिलिपोरसिग्मा, https://www.sigmaaldrich.com/CA/en/applications/cell-culture-and-cell-culture-analysis/cell-analysis/imaging-analysis-and-live-cell-imaging, 7 नवंबर, 2022 को एक्सेस किया गया।
  7. “लाइव सेल फ्लोरोसेंट ऑर्गेनेल रंजक और दाग,” मिलिपोरसिग्मा, https://www.sigmaaldrich.com/CA/en/technical-documents/technical-article/cell-culture-and-cell-culture-analysis/imaging-analysis-and-live-cell-imaging/organelle-dyes- और दाग7 नवंबर, 2022 को एक्सेस किया गया।
  8. एलडी लैविस, आरटी रेंस, “रासायनिक जीव विज्ञान के लिए उज्ज्वल विचार,” एसीएस केम बायोल3(3):142-55, 2008.
  9. “लाइव सेल कैल्शियम संकेतक,” मिलिपोरसिग्मा, https://www.sigmaaldrich.com/CA/en/technical-documents/technical-article/cell-culture-and-cell-culture-analysis/imaging-analysis-and-live-cell-imaging/calcium-indicators7 नवंबर, 2022 को एक्सेस किया गया।
  10. “LentiBrite™ Fluorescent Biosensors का उपयोग करके Autophagy की लाइव सेल इमेजिंग,” मिलिपोरसिग्मा, https://www.sigmaaldrich.com/CA/en/technical-documents/technical-article/cell-culture-and-cell-culture-analysis/imaging-analysis-and-live-cell-imaging/lentibrite-live- सेल-lc3-autophagy7 नवंबर, 2022 को एक्सेस किया गया।
  11. एकत्रीकरण से प्रेरित उत्सर्जन (एआईई डॉट) नैनो प्रौद्योगिकी पर आधारित बायोकम्पैटिबल फ्लोरेसेंट नैनोपार्टिकल का उपयोग कर कैंसर और स्टेम सेल की दीर्घकालिक लाइव सेल ट्रैकिंग। मिलिपोरसिग्मा, https://www.sigmaaldrich.com/CA/en/technical-documents/technical-article/cell-culture-and-cell-culture-analysis/imaging-analysis-and-live-cell-imaging/luminicell-live- सेल-ट्रैकिंग-नैनोपार्टिकल्स7 नवंबर, 2022 को एक्सेस किया गया।
मिलिपोरसिग्मा लोगो बैंगनी रंग में

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