सीसेल की गिनती एक सांसारिक कार्य है, लेकिन यह किसी भी जीवविज्ञानी के लिए मौलिक है जो कोशिकाओं के साथ काम करता है। सेल कल्चर के लिए सेल काउंटिंग आवश्यक है – उचित घनत्व पर सेल सीडिंग, सेल स्वास्थ्य और प्रसार की निगरानी, और उचित मार्ग की सुविधा। यह इन विट्रो प्रयोगों में कई अन्य के लिए भी महत्वपूर्ण है – अमरता, परिवर्तन, संक्रमण, या संक्रमण प्रभावकारिता का आकलन करने के लिए, यह निर्धारित करने के लिए कि उपचार सेल की आबादी को कैसे प्रभावित करता है, और प्रतिक्रिया परिमाण में कृत्रिम विसंगतियों को रोकने के लिए अभिकर्मक या उपचार सांद्रता को निर्धारित करने के लिए। इन सभी कारणों से, शोधकर्ताओं को सटीक, लगातार और तेज़ी से सेल की गिनती करने की आवश्यकता होती है।1
हैंड्स ऑन से हैंड्स ऑफ तक
जीवन विज्ञान प्रयोगशालाओं में मैनुअल सेल काउंटिंग अभी भी बहुत आम है। शोधकर्ता आमतौर पर एक हेमोसाइटोमीटर पर एक सेल निलंबन के एक छोटे से विभाज्य को लोड करते हैं – एक विशेष ऑप्टिकल ग्लास स्लाइड जिसमें लेजर-नक़्क़ाशीदार ग्रिड होता है।2 ऑपरेटर तब प्रकाश माइक्रोस्कोपी के तहत कोशिकाओं की कल्पना करता है, मैन्युअल रूप से एक निश्चित क्षेत्र के भीतर कोशिकाओं की संख्या की गणना करता है, और उस संख्या को वॉल्यूम की प्रति यूनिट सेल एकाग्रता की गणना करने के लिए एक्सट्रपलेशन करता है। हेमोसाइटोमीटर सरल-से-उपयोग और सस्ती हैं,1,2 लेकिन कई प्रमुख अंतर्निहित कमियों के अधीन हैं। क्योंकि प्रक्रिया पूरी तरह से मैनुअल है, उपयोगकर्ता-से-उपयोगकर्ता भिन्नता को विभिन्न चरणों में पेश किया जा सकता है, एलिकोट मिश्रण और तैयारी से लेकर वास्तविक गणना तक और क्या दिया गया सेल उपयोगकर्ता-निर्धारित गिनती क्षेत्र के भीतर आता है। यह प्रक्रिया अनुभवी ऑपरेटरों के लिए भी समय लेने वाली है, और इस प्रकार बड़े पैमाने पर संचालन के लिए आदर्श नहीं है।1,2
स्वचालित सेल काउंटिंग बेहतर सटीकता और तेज थ्रूपुट प्रदान करते हुए मैनुअल सेल काउंटिंग की परिवर्तनशीलता को कम कर सकती है। जबकि कई सेल काउंटर व्यक्तिगत कोशिकाओं को पंजीकृत करते हैं क्योंकि वे प्रकाश बिखराते हैं या विद्युत प्रतिरोध को संशोधित करते हैं, छवि-आधारित स्वचालित सेल काउंटर लोकप्रियता में बढ़ रहे हैं। कैमरा सेंसर तकनीक और कंप्यूटर प्रसंस्करण शक्ति में सुधार द्वारा संचालित, छवि-आधारित सेल की गिनती आम तौर पर कम खर्चीली होती है, इसके लिए कम जटिल नमूना तैयार करने और संभालने की आवश्यकता होती है, और सेलुलर आकारिकी पर दृश्य जानकारी प्रदान करता है। छवि-आधारित सेल काउंटर तेजी से और अधिक सुसंगत गिनती के लिए मशीन लर्निंग और छवि विश्लेषण एल्गोरिदम के निरंतर विकास का लाभ उठा सकते हैं। वास्तव में, कंप्यूटर-आधारित छवि विश्लेषण उन विशेषताओं का पता लगा सकता है जो मानव आंख से आसानी से छूट जाती हैं, जैसे कि नाभिक का आकार।2
सेलड्रॉप: द सस्टेनेबल सॉल्यूशन
सेलड्रॉप™ डीनोविक्स एक छवि-आधारित स्वचालित सेल काउंटर है जो अधिकतम बहुमुखी प्रतिभा के लिए ब्राइटफील्ड और फ्लोरोसेंट ऑप्टिकल चैनल दोनों प्रदान करता है। यह गिनती से पहले बोझिल नमूना कमजोर पड़ने या एकाग्रता कदमों की आवश्यकता को भी हटा देता है, क्योंकि चर-ऊंचाई नमूना कक्ष 7 x 10 से नमूना सेल सांद्रता की माप की सुविधा प्रदान करता है।2 से 2.5 x 107 प्रति मिली लीटर।3 सेलड्रॉप सेल काउंटरों की बहुमुखी प्रतिभा को आगे प्रदर्शित किया जाता है कि कैसे नमूना कक्ष 4 से 400 माइक्रोन तक फैले व्यक्तिगत सेल व्यास को समायोजित कर सकता है।
सेलड्रॉप उपकरण एक उच्च परिभाषा 7 “टचस्क्रीन इंटरफ़ेस से लैस है, जो एक अलग कंप्यूटर टर्मिनल की आवश्यकता को दूर करता है। यह उपकरण वैज्ञानिक द्वारा डिज़ाइन किए गए EasyApps™ सॉफ़्टवेयर द्वारा संचालित है जो पहले से इंस्टॉल किए गए प्रोग्राम के साथ आता है जो आमतौर पर उपयोग किए जाने वाले परीक्षणों के लिए वन-टच विश्लेषण को सक्षम बनाता है। सेलड्रॉप 21 सीएफआर 11 के अनुरूप है, जो पासवर्ड से सुरक्षित सिस्टम एक्सेस, एकीकृत इलेक्ट्रॉनिक हस्ताक्षर नियंत्रण, उपयोगकर्ता खाता प्रबंधन, सुरक्षित ऑडिट ट्रेल रिकॉर्डिंग और उन्नत डेटा हैंडलिंग और निर्यात उपकरण प्रदान करने वाले सॉफ़्टवेयर नियंत्रणों के साथ संगत है।
हालाँकि, सेलड्रॉप की सबसे अनूठी विशेषता यह है कि इसे विज़ुअलाइज़ेशन के लिए डिस्पोजेबल स्लाइड की आवश्यकता नहीं होती है। इसके बजाय, नमूना कक्ष दो स्थायी ऑप्टिकल नीलम सतहों द्वारा बनता है। विश्लेषण के बाद, शोधकर्ता केवल नमूनों को मिटा देते हैं – एक सफाई प्रक्रिया जिसे उपकरण की लाइव-व्यू छवि द्वारा सत्यापित किया जा सकता है। इस स्लाइड-मुक्त दृष्टिकोण में महत्वपूर्ण पर्यावरणीय प्रभाव हैं, जिसमें लाखों स्लाइडों को बचाने की क्षमता है – दसियों हज़ार किलोग्राम प्लास्टिक के बराबर – लैंडफिल से।4 सस्टेनेबिलिटी में सेलड्रॉप के योगदान को SelectScience® द्वारा मान्यता दी गई है, जिन्होंने अपने 2022 साइंटिस्ट्स च्वाइस अवार्ड्स® में इस उपकरण को “सस्टेनेबल लेबोरेटरी प्रोडक्ट ऑफ द ईयर” नाम दिया है।4
संदर्भ
- के। ओंगेना एट अल।, “राजदंड सेल काउंटर का उपयोग करके सेल संस्कृति के दौरान सेल संख्या निर्धारित करना,” जम्मू विज़ ऍक्स्प45:2204, 2010। डोई: 10.3791/2204।
- ए। वेम्बाडी एट अल।, “सेल साइटोमेट्री: बायोटेक्नोलॉजिकल एडवांस पर समीक्षा और परिप्रेक्ष्य,” फ्रंट बायोएंग बायोटेक्नोल7:147, 2019. डीओआई: 10.3389/fbioe.2019.00147।
- “डीनोविक्स को सेलड्रॉप™ ऑटोमेटेड सेल काउंटर के लिए पेटेंट मिला,” डीनोविक्स इंक. प्रेस विज्ञप्ति, 12 जून, 2019।
- “डीनोविक्स सेलड्रॉप को वर्ष के टिकाऊ प्रयोगशाला उत्पाद से सम्मानित किया गया,” डीनोविक्स इंक प्रेस विज्ञप्ति, 10 जनवरी, 2023।